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免疫膠體金技術(Immune colloidal gold technique) 是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術。膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)。免疫膠體金技術以其特異性強、靈敏度高、操作簡便、低成本、率等特點,被廣泛應用于醫(yī)學、農(nóng)牧業(yè)、環(huán)境及食品檢測等領域。
免疫膠體金技術檢測原理
免疫膠體金技術的反應過程是一個由金顆粒、抗原與抗體動態(tài)結(jié)合的反應過程,在這個過程中很多因素影響實驗的結(jié)果，如：膜、結(jié)合墊等耗材的孔徑大小影響標記物的流動速率；標記蛋白、T線和C線的抗原或者抗體的純度和濃度直接影響金標探針的質(zhì)量；PH和環(huán)境條件影響檢測靈敏度。
制備高質(zhì)量膠體金時純水使用的注意事項
（1）玻璃器皿必須*清洗，盡量使用經(jīng)過硅化處理的玻璃器皿，或用前一次配制的膠體金穩(wěn)定的玻璃器皿，再用超純水沖洗后使用。
（2）試劑配制必須保持嚴格的純凈，所有試劑都必須使用超純水配制，或者在臨用前將配好的試劑經(jīng)超濾或微孔濾膜（0.22 µm）過濾。
（3）配制膠體金溶液的pH以中性（pH7.2）較好。
純水中影響膠體金質(zhì)量的因素：
1.水中的離子雜質(zhì)會改變pH值及離子強度
pH值對膠體金顆粒大小和蛋白吸附能力有一定的影響。只有在pH接近和稍高于蛋白質(zhì)的等電點時，膠體金蛋白質(zhì)的吸附力強；pH過高過低都不利于膠體金的標記。溶液的顏色也與pH值相關聯(lián)。離子強度影響膠體金與蛋白質(zhì)的成功結(jié)合，或?qū)е履z體金粒子的凝聚，降低膠體金的檢測能力。
2.有機物除了可能改變pH值外，還會與蛋白質(zhì)形成結(jié)合體。
有機物會影響生物大分子與金顆粒結(jié)合和活化后金顆粒的穩(wěn)定性，干擾蛋白-金復合體的形成，使其不穩(wěn)定或者容易失活，不能獲得預期大小的金顆粒，終影響探針的靈敏度。
3.顆粒會干擾膠體金顆粒的生成。
如果金顆粒的形狀不規(guī)則或粒徑不均一，使得膠體金標記物容易解離和沉淀而產(chǎn)生金標擴散不*、反應區(qū)底色過深和假陽性現(xiàn)象。
4.微生物產(chǎn)生的雜質(zhì)影響膠體金的制備
微生物產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物和死亡時的細胞裂解物，諸如顆粒，有機物，離子等各種雜質(zhì)，也會影響膠體金的制備。
膠體金檢測結(jié)果圖
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